南京森贝伽生物科技有限公司
英文名称：Human Interleukin 12,IL-12/P40 ELISA KIT
产品货号：SBJ-H0478
规格：96T/48T
品牌：森贝伽
检测方法：酶免法/酶联免疫法(ELISA)
种属：人ELISA试剂盒
检测波长：450nm
所需样本体积：50-100ul
产品用途：仅供科研使用
保存条件：2-8℃，六个月
检测目的：用于测定血清，血浆及相关液体等样本。例如适合检测包括血清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等标本。
森贝伽供应的种属有：人、大鼠、小鼠、豚鼠、兔子、猪犬、牛羊、鸡鸭、植物ELISA试剂盒等
1. 血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。
2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。
3. 尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
5. 组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。
6. 标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融.
7. 不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
计算：以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。
| 出现问题 | 问题的原因 | 解决办法 |
| 加入反应终止液后， 没有吸光值或吸光值偏低 | 未加入酶标记物 | 请按照操作步骤进行 |
| 试剂盒内容物未能充分回 | 确定试剂盒内容物回温 后再进行操作 | |
| 室温太低 | 若室温太低（<19℃）， 适当延长温育时间 | |
| 未使用试剂盒的清洗液清洗 | 请用试剂盒内所提供 的清洗液清洗 | |
| 试剂盒已过有效期限 | 请更换成仍在有效期 限内的试剂盒 | |
| 标准曲线线性不佳， 或是平行性不好 | 温育位置避光不好 或受到气流干扰 | 请确认温育位置既不透光 也不透风（如抽屉内） |
| 操作时间拖太久 | 请在方法熟练后再进行操作 | |
| 微孔间相互污染 | 加样品时，请小心勿溅出微孔外，以免造成其它微孔的污染 | |
| 标准品或酶标记物 所加入的量不一致 | 请使用已校正过的移液枪， 并确保其与吸头之间 有高度密合性 | |
| 添加样品或试剂的 操作方法不正确 | 加样品或试剂时， 吸头请勿接触微孔 | |
| 洗板过程发生问题（如管路 堵塞、洗完板后未立刻 进行下一步骤） | 请随时监控洗板机洗板过程，洗完后立即进行下一步骤 | |
| 吸光值均偏高 （或线性不够陡） | 底物溶液受到污染 | 若发现底物溶液已呈现淡蓝色，请不要再使用 |
| 反应时间超过太久 | 请控制反应时间 | |
| 酶标记物污染了盒内 其它试剂 | 使用过的吸头应立即丢弃，可避免试剂间相互污染，凡是试剂（特别是酶标记物与底物溶液）接触过的容器应立即清洗干净。（先以漂白水浸泡，再以清水冲洗干净，可确保无残留） | |
| 阴性标准品的吸光值低于阳性标准品的吸光值 | 微孔中的试剂未能充分混合 | 试剂加完后，需轻敲盘四周使其充分混合均匀 |
| 洗板过程发生问题 | 请随时监控洗板机洗板过程，洗完后立即进行下一步骤 | |
| 添加样品或酶标记物的量不一致 | 请使用已校正过的移液枪，并确保其与吸头之间有高度密合性 |
南京森贝伽长期专业供应各类科研产品，包括ELISA试剂盒、生物试剂、标准品对照品、培养基、抗体、染色液染色试剂盒等优质产品。森贝伽本着客户至上的原则为客户提供高质星高品质的产品，公司承诺如有任何质量的问题请打电话与我们工作人员联系，免费包退换（非人为因素造成的）会给您一个满意的答复。欢迎来电咨询人内皮抑素(ES) ELISA KIT最新报价、实验原理、产品用途及中英文说明书！
