【规格】 1ml/1.5ml
【保存】 2-8℃,12个月
【类型】 阳离子聚合物
【产品介绍】
BC Trans-DNA是一款性能优良的DNA转染试剂,可用于质粒DNA的传送。它具有较强的DNA转染能力,具有不受血清影响、毒性低、稳定性好、转染简单易行、重复性好等优点。
【应用范围】
BC Trans-DNA转染试剂可适用于众多易转染细胞株的DNA转染、瞬时转染及稳定转染。适用于多种贴壁细胞系,特别适用于各种常规细胞如HeLa、293T、COS7、CHO和B16F10等,均可得到较高的转染效率,且重复性好。
【质粒DNA转染步骤】
请确保所有操作都在无菌条件下进行,并遵循实验室的安全规范。
以24孔板为例,请参考表1的转染规模调整,步骤如下:
1. 细胞接种: 每孔接种0.5~1.0×105个细胞,细胞培养12~24小时,使转染时细胞密度达到60~70%融合度
2. 质粒稀释: 将0.4µg质粒稀释于Opti-MEM培养基中,终体积10µL
3. 复合物制备: 按比例取适量BC Trans-DNA稀释于Opti-MEM培养基中, 终体积10µL,室温孵育5分钟后与质粒稀释液混匀
4. 室温静置20分钟
5. 每孔20µL 复合物加入细胞培养板中,混匀,37℃培养18~48小时后检测基因表达,无需更换培养基
【质粒DNA的转染优化】
可通过改变细胞密度、 DNA浓度以及BC Trans-DNA浓度对转染进行优化。保证细胞融合度在60%以上,BC Trans-DNA (µL):DNA (µg)可以在1:1和5:1之间调整。
表1. 不同培养板所需转染试剂和DNA的用量
培养板 |
| 接种 培养基 | Opti-MEM稀 释后终体积 | DNA转染 | |
试剂用量 | DNA | ||||
96孔板 | 0.3cm2 | 200µL | 10µL | 0.4µL | 0.2µg |
24孔板 | 2.0cm2 | 500µL | 20µL | 0.8µL | 0.4µg |
12孔板 | 4.0cm2 | 1mL | 40µL | 2µL | 1 µg |
6孔板 | 10.0cm2 | 2mL | 100µL | 4µL | 2µg |
60mm | 20.0cm2 | 5mL | 0.2mL | 8µL | 4µg |
10cm | 60.0cm2 | 15mL | 0.6mL | 24µL | 12µg |
标签:细胞转染