【规格】 1ml/1.5ml
【保存】 2-8℃,12个月
【类型】 阳离子聚合物
【产品介绍】
BC Trans-mRNA是一款高性能的专用转染试剂,专为mRNA设计,适用于在多种贴壁细胞中进行mRNA转染。这款试剂的独特之处在于,它能够直接将mRNA传递到细胞质中进行表达,从而巧妙地绕过了转录调控作用以及进入细胞核的限制。因此,BC Trans-mRNA成为短期蛋白表达相关研究工作的理想选择,为科研人员提供了便捷、高效的工具。
【应用范围】
BC Trans-mRNA转染试剂展现出广泛的适用性,能够高效应对众多贴壁或悬浮细胞株的mRNA转染需求。无论是在常规细胞、难以转染的细胞、原代细胞还是干细胞中,该试剂都能实现较高的转染效率,并且性能稳定可靠。与其他转染试剂相比,BC Trans-mRNA对血清的干扰极小、毒性低、稳定性好、操作简便易行以及良好的重复性。
【mRNA的转染步骤】
以24孔板为例,请参考表1的转染规模调整,步骤如下:
1. 细胞接种: 每孔接种0.5~1.0×105个细胞,细胞培养12~24小时,使转染时细胞密度达到60~70%融合度。
2. mRNA稀释: 将mRNA稀释于Opti-MEM培养基中,终浓度0.1mg / mL。
3. 复合物制备:
(1)取1µL的BC Trans-mRNA试剂原液加入到9µL Opti-MEM培养基中
(2)取4µL浓度为0.1mg / mL的mRNA加入到6µL Opti-MEM培养基中
(3)两者等体积混合
(4)室温静置10分钟
4. 转染细胞:将20µL的转染复合物均匀加入到细胞培养板的每个孔中,并轻轻混匀。
5. 培养与检测:将细胞在37℃下继续培养18~48小时。在此期间,无需更换培养基。
【mRNA的转染优化】
可通过改变细胞密度、 mRNA浓度以及BC Trans-mRNA浓度对转染进行优化。保证细胞融合度在60%以上,BC Trans-mRNA (µL): mRNA (µg)可以在2:1和5:1之间调整。
表1. 不同培养板所需转染试剂和mRNA的用量
培养板 |
| 接种 培养基 | Opti-MEM培养 基释后终体积 | mRNA转染 | |
试剂用量 | mRNA | ||||
96孔板 | 0.3cm2 | 200µL | 10µL | 0.5µL | 0.2µg |
24孔板 | 2.0cm2 | 500µL | 20µL | 1µL | 0.4µg |
12孔板 | 4.0cm2 | 1mL | 40µL | 2.5µL | 1µg |
6孔板 | 10.0cm2 | 2mL | 100µL | 5µL | 2µg |
60mm | 20.0cm2 | 5mL | 200µL | 10µL | 4.0µg |
10cm | 60.0cm2 | 15mL | 600µL | 30µL | 12µg |
标签:转染