【规格】 1ml/1.5ml
【保存】 2-8℃,12个月
【类型】 阳离子聚合物
【产品介绍】
BC Trans-siRNA是一款新型、性能稳定的siRNA专用转染试剂,它具有较强的压缩RNA的能力,能够把RNA高效率、迅速地转染到真核细胞之中,而不被核酸酶降解。BC Trans-siRNA具有毒性低、稳定性好、耐血清能力强、转染简单易行、重复性好等优点。
【应用范围】
BC Trans-siRNA转染试剂可适用于众多原代培养和转化细胞株的siRNA转染。沉默效率高且性能稳定,在有无血清存在的细胞培养基中均能获得非常理想的基因沉默效果。
【siRNA的转染步骤】
请确保所有操作都在无菌条件下进行,并遵循实验室的安全规范。
以24孔板为例,请参考表1的转染规模调整,步骤如下:
1. 细胞接种: 每孔接种0.5~1.0×105个细胞,细胞培养12~24小时,使转染时细胞密度达到60~70%融合度
2. siRNA稀释: 将15pmol的siRNA稀释于Opti-MEM培养基中,终体积10µL
3. 复合物制备: 按比例取适量BC Trans-siRNA稀释于Opti-MEM培养基中, 终体积10µL,立即与siRNA稀释液混匀
4. 室温静置15分钟
5. 每孔20µL 复合物加入细胞培养板中,混匀,37℃培养18~48小时后检测沉默效率,无需更换培养基
【siRNA转染的优化】
可通过改变细胞密度、siRNA浓度以及BC Trans-siRNA浓度对转染进行优化。保证细胞融合度在60%以上,BC Trans-siRNA (µL): siRNA(pmol)可以在0.02:1和0.15:1之间调整。
表1. 不同培养板所需转染试剂和siRNA的用量
培养板 |
| 接种 培养基 | Opti-MEM培养 基释后终体积 | siRNA转染 | |
试剂用量 | siRNA | ||||
96孔板 | 0.3cm2 | 200µL | 10µL | 0.5µL | 7.5pmol |
24孔板 | 2.0cm2 | 500µL | 20µL | 1.0µL | 15pmol |
12孔板 | 4.0cm2 | 1mL | 40µL | 2.0µL | 30pmol |
6孔板 | 10.0cm2 | 2mL | 100µL | 4.0µL | 60pmol |
标签:细胞转染