南京森贝伽生物科技有限公司
【规格】 1ml/1.5ml
【保存】 2-8℃，12个月
【类型】 阳离子聚合物
【产品介绍】
BC Trans-Universal是一款高性能、高品质的通用型基因转染试剂，既可用于转染质粒DNA，又具有较强的RNA转染能力。BC Trans-Universal具有不受血清影响、毒性低、稳定性好、转染简单易行、重复性好等优点。
【应用范围】
BC Trans-Universal转染试剂可适用于众多较难转染细胞株的DNA/siRNA转染、瞬时转染及稳定转染。适用于多种贴壁细胞，特别适用于各种较难转细胞如L929、NIH3T3、MCF-7和A549等，均可得到较高的转染效率，且重复性好。
【 质粒DNA的转染步骤】
1. 质粒DNA的转染:
以24孔板为例，请参考表1的转染规模调整，步骤如下:
（1） 细胞接种: 每孔接种0.5~1.0×105个细胞，细胞培养12~24小时，使转染时细胞密度达到60~70%融合度
（2） 质粒稀释: 将0.4µg质粒稀释于Opti-MEM培养基中，终体积10µL
（3） 复合物制备: 按比例取适量BC Trans-Universal稀释于Opti-MEM培养基中， 终体积10µL，室温孵育5分钟后与质粒稀释液混匀
（4）室温静置20分钟
（5） 每孔20µL 复合物加入细胞培养板中，混匀，37℃培养18~48小时后检测基因表达，无需更换培养基
2. siRNA的转染
转染步骤与DNA相同，请参考表1的转染规模进行调整，所有数量和体积均是按孔计算。转染高密度细胞可获得高转染效率、高表达水平和低细胞毒性。
【质粒DNA和siRNA的转染优化】
可通过改变细胞密度、 DNA/siRNA浓度以及BC Trans-Universal浓度对转染进行优化。保证细胞融合度在60%以上，BC Trans-Universal (µL): DNA (µg)可以在1:1和5:1之间调整；BC Trans-Universal (µL): siRNA(pmol)可以在0.02:1和0.15:1之间调整。
表1. 不同培养板所需转染试剂和DNA/siRNA的用量
| 培养板 |
| 接种 培养基 | Opti-MEM稀 释后终体积 | DNA转染 | siRNA转染 | ||
| 试剂用量 | DNA | 试剂用量 | siRNA | ||||
| 96孔板 | 0.3cm2 | 200µL | 10µL | 0.4µL | 0.2µg | 0.5µL | 7.5pmol |
| 24孔板 | 2.0cm2 | 500µL | 20µL | 0.8µL | 0.4µg | 1.0µL | 15pmol |
| 12孔板 | 4.0cm2 | 1mL | 40µL | 2µL | 1µg | 2.0µL | 30pmol |
| 6孔板 | 10.0cm2 | 2mL | 100µL | 4µL | 2µg | 4.0µL | 60pmol |
| 60mm | 20.0cm2 | 5mL | 0.2mL | 8µL | 4µg | 10µL | 100pmol |
| 10cm | 60.0cm2 | 15mL | 0.6mL | 24µL | 12µg | 30µL | 300pmol |
标签：转染
