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细胞划痕实验

点击次数:2923次     发布时间:2015/3/11 16:22:34

细胞划痕实验是一种简单易行的检测细胞运动的方法,实验成本低,可以用来检测贴壁生长肿瘤细胞的侵袭转移能力。

实验材料细胞样品
试剂、试剂盒无血清培养基PBS
仪器、耗材6孔板marker笔直尺枪头
抗体Hamster IgG3, λ抗体
Hamster IgG3, λ抗体
Hamster IgG3, λ抗体

实验步骤
一.准备:
所有能灭菌的器械都要灭菌,直尺和marker笔在操作前紫外照射30min(超净台内)

二.流程:
1.先用marker笔在6孔板背后,用直尺比着,均匀得划横线,大约每隔0.5~1cm一道,横穿过孔。每孔至少穿过5条线。
2.在空中加入约5X105个细胞,具体数量因细胞不同而不同,掌握为过夜能铺满。
3.第二天用枪头比着直尺,尽量垂至于背后的横线划痕,枪头要垂直,不能倾斜。
4.用PBS洗细胞3次,去处划下的细胞,加入无血清培养基。
5.放入37度5%CO2培养箱,培养。按0,6,12,24小时取样,拍照。

下面是照片,细胞NIH3T3
0h



6h


12h

24h

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