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免疫荧光技术服务

点击次数:7418次     发布时间:2013/12/5 9:17:02

一、免疫荧光技术简介
Coons等于1941年首次采用荧光素进行标记而获得成功。这种以荧光物质标记抗体而进行抗原定位的技术称为荧光抗体技术(fluorescentantibodytechnique)。用荧光抗体示踪或检查相应抗原的方法称荧光抗体法;用已知的荧光抗原标记物示踪或检查相应抗体的方法称荧光抗原法。这两种方法总称免疫荧光技术,因为荧光色素不但能与抗体球蛋白结合,用于检测或定位各种抗原,也可以与其他蛋白质结合,用于检测或定位抗体,但是在实际工作中荧光抗原技术很少应用,所以人们习惯称为荧光抗体技术,或称为免疫荧光技术。以荧光抗体方法较常用。[1]用免疫荧光技术显示和检查细胞或组织内抗原或半抗原物质等方法称为免疫荧光细胞(或组织)化学技术。

二、免疫荧光技术原理
免疫荧光细胞化学是根据抗原抗体反应的原理,先将已知的抗原或抗体标记上荧光素制成荧光标记物,再用这种荧光抗体(或抗原)作为分子探针检查细胞或组织内的相应抗原(或抗体)。在细胞或组织中形成的抗原抗体复合物上含有荧光素,利用荧光显微镜观察标本,荧光素受激发光的照射而发出明亮的荧光(黄绿色或桔红色),可以看见荧光所在的细胞或组织,从而确定抗原或抗体的性质、定位,以及利用定量技术测定含量。

三、免疫荧光技术服务内容
收费标准
询价
服务周期
我公司在接受实验委托1~3周内完成实验并交付实验报告。

四、免疫荧光技术服务技术步骤
① 固定:4%多聚甲醛,室温固定20 min,PBS洗三次,每次3 min;
② 透膜:0.5% Triton X-100 in PBS,室温10 min,PBS洗三次,每次3 min;
③ 封闭:1%BSA in PBS,室温30 min,PBS洗一次,3 min;
④ 一抗:按照抗体说明书配制适当比例的一抗,室温1-2 h或4 ℃过夜,PBS洗三次,每次5 min;
⑤ 二抗:按照抗体说明书配制适当比例的二抗,室温1-2 h,PBS洗三次,每次5 min;
⑥ 细胞核染色:1 μg/mL DAPI,室温10 min,PBS洗三次,每次5 min;
⑦ 封片:2-3 μL抗淬灭剂封片。
⑧ 观察:用荧光显微镜观察结果。 

五、如有任何疑问,详情请电话或 E-mail 咨询
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